介绍了常用的几种细胞裂解液配方及其组成试剂,包括RIPA裂解液、RIPA缓冲液、NP-40裂解液、RIPA-M裂解液、酸性裂解液。同时提醒在使用细胞裂解液时需要注意安全操作。
细胞裂解液是实验室中常用的一种试剂,用于将细胞破裂并释放出细胞内的蛋白质、核酸等物质。不同种类的细胞需要不同的裂解液,而裂解液的配方也因实验目的而有所不同。下面我们介绍一些常用的细胞裂解液配方及其组成试剂。
1. RIPA裂解液
RIPA裂解液是一种常用的含有表面活性剂的裂解液,适用于提取膜蛋白、核糖体蛋白及细胞内蛋白等。其配方包括:
- 50 mM Tris-HCl pH 7.4
- 150 mM NaCl
- 1% NP-40
- 0.5% sodium deoxycholate
- 0.1% SDS
2. RIPA缓冲液
RIPA缓冲液是RIPA裂解液的简化版,适用于提取一般的细胞蛋白。其配方包括:
- 50 mM Tris-HCl pH 8.0
- 150 mM NaCl
- 1% NP-40
- 0.5% sodium deoxycholate
- 0.1% SDS
3. NP-40裂解液
NP-40裂解液是一种不含有表面活性剂的裂解液,适用于提取细胞核及胞浆内蛋白。其配方包括:
- 50 mM Tris-HCl pH 8.0
- 150 mM NaCl
- 1% NP-40
- 1 mM EDTA
4. RIPA-M裂解液
RIPA-M裂解液是一种改良的RIPA裂解液,适用于提取膜蛋白及膜相关蛋白。其配方包括:
- 50 mM Tris-HCl pH 7.4
- 1% Triton X-100
- 0.5% sodium deoxycholate
- 0.1% SDS
- 150 mM NaCl
5. 酸性裂解液
酸性裂解液适用于提取核酸。其配方包括:
- 50 mM Tris-HCl pH 8.0
- 10 mM EDTA
- 1% SDS
- 0.1 M NaCl
以上是常用的几种细胞裂解液配方及其组成试剂。当然,在实验设计时,还需要考虑实验目的、细胞类型、细胞数量等因素,选择适合的细胞裂解液。同时,在使用细胞裂解液时,需要注意安全操作,避免接触到有毒有害物质。